›› 2011, Vol. 23 ›› Issue (2): 81-086.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2011.02.001
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刘江正,海春旭*,梁 欣
LIU Jiang-zheng,HAI Chun-xu*,LIANG Xin
摘要: 研究乙醇对氧化应激损伤的作用特点和红景天醇提物的抗氧化作用。方法: 采用DPPH自由基生成体系、体外鲁米诺化学发光反应(·OH和O2-.)体系观察红景天醇提物对DPPH自由基、·OH和O2-.化学发光强度的抑制作用以及剂量-效应关系。采用乙醇诱导人正常肝细胞系QZG细胞的氧化应激反应模型,观察红景天醇提物对乙醇诱导细胞活力和氧化应激损伤的保护作用。实验分设红景天醇提物3个不同浓度(50、100、200 mg/L)的预防给药组和治疗给药组、阳性对照组(200 m mol/L乙醇干预)和阴性对照组(不加受试物)。预防给药组用红景天醇提物预处理QZG细胞12 h后,再加入200 m mol/L乙醇处理6 h,治疗给药组采用红景天醇提物和乙醇同时处理QZG细胞6 h。用MTT试验和生化法测定细胞活力、细胞丙二醛(MDA)、还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH、GSSG)和总巯基(T-SH)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧阴离子歧化酶(SOD)活力;免疫印迹法检测细胞抗氧化酶血红素加氧酶-1 (HO-1)和核因子相关因子2 (NRF-2)蛋白的表达。 结果: 红景天醇提物对自由基的生成具有显著的抑制作用,呈现较为明显的剂量-效应关系;红景天醇提物可有效保护乙醇所致的肝细胞活力损伤,且治疗组具有明显的剂量-效应关系。与阳性对照组相比,红景天醇提物干预组细胞的MDA含量和GSSG含量下降 (P < 0.05),GSH和T-SH含量显著升高(P < 0.05);CAT和SOD活性也显著升高(P < 0.05)。免疫印迹测定结果表明,红景天醇提物可以诱导HO-1蛋白和NRF-2蛋白表达上调(P < 0.05)。 结论: 红景天醇提物在体外自由基模型中具有较强的抗自由基作用,可保护乙醇导致的QZG细胞氧化损伤,其作用机制可能和抗氧化作用相关。